实验步骤包括:构建包含靶启动子的荧光素酶报告基因质粒;通过共转染报告基因质粒与海肾荧光素酶质粒,检测荧光强度以反映荧光素酶活性;利用定量萤火虫荧光强度与海肾荧光素酶强度比值,判断启动子活性。此系统技术优势明显,易于定量、便于检测、灵敏度高且反应迅速,无交叉干扰,稳定性强,对实验结果具有...
一文解读双荧光素酶报告基因检测系统!
双荧光素酶报告基因检测系统,以荧光素酶活性检测为原理,结合萤火虫荧光素酶与海肾荧光素酶,形成双系统检测,确保实验结果准确可靠。此系统广泛应用于细胞生物学研究,如启动子活性验证、转录因子互作检测及基因表达分析等。
实验原理核心在于,构建报告基因质粒,通过细胞转染与裂解后,经荧光测定仪检测生物荧光,以此反映基因是否存在靶向互作。在实验过程中,通过引入海肾荧光素酶作为内参基因,有效排除转染效率等差异带来的干扰。
实验步骤包括:构建包含靶启动子的荧光素酶报告基因质粒;通过共转染报告基因质粒与海肾荧光素酶质粒,检测荧光强度以反映荧光素酶活性;利用定量萤火虫荧光强度与海肾荧光素酶强度比值,判断启动子活性。
此系统技术优势明显,易于定量、便于检测、灵敏度高且反应迅速,无交叉干扰,稳定性强,对实验结果具有显著提升作用。应用范围广泛,涵盖启动元件验证、转录因子结合位点检测、转录调控研究及m6A修饰验证等。
通过此系统,研究人员能更精准地分析基因表达、启动子活性及转录调控机制,擎科生物提供双荧光素酶报告基因检测服务,包括转录因子验证、启动子/增强子研究、miRNA与基因互作分析等,确保实验流程高效、结果准确。2024-10-25