荧光素酶报告基因系统是一种通过荧光素酶催化荧光素氧化产生生物荧光来检测荧光素酶活性的方法。萤火虫荧光素酶通常作为主报告基因，而海肾荧光素酶则用作内参，以平衡细胞数量、转染效率、表达效率的差异。该系统在研究调控元件功能、miRNA靶位点以及信号通路方面有着广泛应用。例如，通过构建报告基因质粒与...
一文了解 luciferase报告基因系统的应用
荧光素酶报告基因系统是一种通过荧光素酶催化荧光素氧化产生生物荧光来检测荧光素酶活性的方法。
萤火虫荧光素酶通常作为主报告基因，而海肾荧光素酶则用作内参，以平衡细胞数量、转染效率、表达效率的差异。
该系统在研究调控元件功能、miRNA靶位点以及信号通路方面有着广泛应用。
例如，通过构建报告基因质粒与表达待检测转录因子的质粒共转染，可以直接定量检测转录因子对靶启动子的调控作用。
此外，通过将miRNA的靶标3' UTR目的基因构建至报告基因下游，可以验证miRNA与靶基因的直接靶向关系。
在信号通路的研究中，报告基因法可以用来研究ADCC/ADCP效应等，例如通过基因工程改造的Jurkat细胞作为效应细胞，通过NFAT通路活化产生的荧光素酶活性来定量检测治疗性抗体Fc效应因子的功能。
此外，报告基因法在免疫检查点靶向药筛选中也得到了应用，例如TIGHT免疫的治疗性抗体的生物活性功能可以通过报告基因法进行评估。2024-09-03
