获取含有T7 promoter序列的正义链和反义链DNA作为体外转录制备RNA pull down探针的模板。实验材料包括主要试剂和仪器及器材。实验方法涉及PCR扩增目的片段、胶回收等步骤。实验结果通过琼脂糖凝胶电泳检测正义链和反义链PCR扩增产物。
RNA pull down实验方法及检测报告模板
构建hsa_circ_0007142全序列载体，以hsa_circ_0007142质粒全长序列为模板进行PCR扩增，获取含有T7 promoter序列的正义链和反义链DNA作为体外转录制备RNA pull down探针的模板。实验材料包括主要试剂和仪器及器材。实验方法涉及PCR扩增目的片段、胶回收等步骤。实验结果通过琼脂糖凝胶电泳检测正义链和反义链PCR扩增产物。
接下来进行RNA pull down实验，目的为在HNEpc细胞的对照组及模型组中钓取与lnc NEAT1有相互作用的蛋白，并通过WB验证。实验材料同样包括主要试剂和仪器及器材。实验方法涉及体外转录并生物素标记RNA，链霉素亲和磁珠与生物素标记的RNA结合，磁珠复合物与蛋白结合，最后进行SDS-PAGE凝胶电泳和银染等步骤。实验结果通过RNA pull down银染和WB结果呈现。
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