常见报告基因:荧光素酶(Luciferase):来源:来源于萤火虫Photinus pyralis。原理:该基因编码一个61kDa的酶,在ATP、氧气和Mg2+存在的条件下氧化D-荧光素,产生的荧光产物可进行定量测定。优点:荧光素酶分析法极为迅速、简单,而且比较廉价、敏感,具有较宽的线性范围。缺点:检测所需的仪器较为昂贵。...
常见的报告基因包括以下几种:氯霉素乙酰基转移酶:特点:作为第一个检测细胞内转录活性的基因,它在哺乳细胞中无内源性表达。检测方法:通过检测其催化氯霉素解毒的能力来判断基因活性,可用同位素、荧光或酶联免疫吸附测定法检测。注意事项:线性范围和灵敏性相对较弱。β半乳糖苷酶:来源:编码于大肠杆菌...
β半乳糖苷酶是另一种常用报告基因,编码于大肠杆菌的lacZ基因,其易于通过免疫组织化学观察。使用ONPG或CPRG底物检测其酶活性,ONPG灵敏度较低,而CPRG更高。荧光素酶,如细菌荧光素酶、萤火虫荧光素酶和Renilla荧光素酶,因其非放射性和高效性,尤其适合哺乳细胞研究。Promega的pGL3载体提供了分析转录活性...
β半乳糖苷酶基因:简介:βgal基因编码的酶能够水解底物如Xgal,产生蓝色或绿色产物,易于肉眼观察。应用:广泛用于基因表达的定性分析,特别是在细菌及一些真核细胞中。荧光素酶基因:简介:荧光素酶基因编码的酶在氧气、荧光素及镁离子的存在下,能够催化荧光素的氧化,发出生物荧光。应用:因其检测灵敏...
常见的报告基因包括: 荧光素酶:来自萤火虫的荧光基因,其酶活性在特定条件下能产生荧光,是快速且广泛应用的检测工具。 氯霉素乙酰转移酶:通过催化氯霉素的乙酰化提供检测方法,虽然放射性检测手段复杂,但非放射性方法也日益流行。 β半乳糖苷酶:作为内部对照,用于检测其他报告基因的表达,具有简单易测...