三、实验方法 1. 实验步骤包括样本准备、抗体选择、RIP反应、样本纯化和验证分析。2. 实验流程涉及多个关键步骤，确保实验的可靠性和准确性。3. 案例展示：一篇发表在“Nucleic Acids Res”期刊的研究展示了circ-Foxo3通过与p21和CDK2结合调控细胞周期。通过cyclin A等蛋白的抗体进行RIP，PCR检测circ-Foxo3...
干货分享| RNA结合蛋白免疫沉淀RIP实验原理及报告解析
一、背景介绍
非编码RNA在生命过程中的重要性不容小觑，尽管它们在人类基因组中占绝大多数，但对它们的研究正逐渐成为生命科学领域的重要前沿。这些RNA在生长发育、疾病如艾滋病、白血病、糖尿病、畸形，以及干细胞和表观遗传学调控中扮演着关键角色。
RNA-蛋白复合物在基因表达的转录后调控中起着关键作用，包括剪接、出核转运、mRNA稳定性以及蛋白转译。因此，理解基因调控就离不开明确这些过程中RNA结合的变化。随着RNA研究的日益重要，RIP技术作为研究RNA与蛋白结合情况的工具，正受到越来越多的关注，成为了解转录后调控网络动态过程的有效手段。
1. 概述：RIP技术通过特异性抗体捕获目标蛋白及其结合的RNA，通过分离纯化后进行验证或分析。它与ChIP技术相似，但研究对象是RNA-蛋白复合物，因此优化条件有所不同，包括试剂和抗体的RNA酶去除、抗体的RIP实验验证等。
二、技术应用
RIP技术适用于研究RNA与蛋白的结合情况，发现RBP与非编码RNA的相互作用，并绘制全基因组范围的RNA-RBP相互作用图谱。
三、实验方法
1. 实验步骤包括样本准备、抗体选择、RIP反应、样本纯化和验证分析。
2. 实验流程涉及多个关键步骤，确保实验的可靠性和准确性。
3. 案例展示：一篇发表在“Nucleic Acids Res”期刊的研究展示了circ-Foxo3通过与p21和CDK2结合调控细胞周期。通过cyclin A等蛋白的抗体进行RIP，PCR检测circ-Foxo3，结果展示了RIP技术在具体科学研究中的应用。
四、服务内容
1. 提供客观真实的实验过程及结果，确保原始数据的透明性。
2. 实验过程全程记录，确保实验数据的真实性和可追溯性。2024-11-15
